细胞名称:A172细胞,人胶质母细胞瘤细胞
生长特性:贴壁 上皮样
种 属:人
培养难度:★★
培养基:90%DMEM+10%FBS(推荐HAKATA优等胎牛血清,货号:HN-FBS-500)
温度:37℃ 气相:95%空气,5% CO2
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,传代比例为1:2到1:4;
3.传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
冻存条件:80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO
(*建议使用本公司无血清细胞冷冻液(H-W-100),用4度保存的冷冻液重悬细胞,直接冻存于-80°C。)
长期存储:液氮
该产品仅供研究使用。
我们采取两种形式的细胞发货方式:
1. 复苏发货
a. T25瓶活细胞发货
b. 血清重悬发货
2. 冻存管发货(干冰发货)
对于采取冻存管方式发货的客户,为了保证可靠性我们会多发一管细胞(共2管),干冰覆盖保温运输。
复苏及冻存发货方式均为顺丰速运,我们会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式(T25/血清重悬/冻存/用户指定),并在发货前的3天内与您确认收货地址及配送方式。
使用HAKATA系列产品(HAKATA全系列:血清、冻存液、试剂、细胞株等)培养细胞并在中文核心期刊杂志或SCI期刊杂志发表文章,且文章中材料和方法栏中标注我公司品牌名或公司名(英文:HAKATA或Shanghai Chuanqiu Biotechnology Co.,Ltd, China,中文:HAKATA或传秋生物)
该奖励方案长期有效,欢迎大家与我们分享获得成果的喜悦!
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