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细胞冻存液比例是多少?

细胞冻存液比例

 

冻存液配制:
20%胎牛血清、10%DMSO、70%1640培养液;或90%血清、10%DMSO,更可防止细胞内冰晶形成。
DMSO在4℃时对细胞无明显毒性,分子量小、溶解度大、易透过细胞膜,降低细胞外未结冰溶液中溶质浓度,使细胞免受高浓度溶质的损伤,细胞内水分也不会过分外渗,避免了细胞过分脱水皱缩;DMSO与水分子结合,可使冰点下降,减少细胞内冰晶的形成,从而减少冰晶损伤.

FBS:DMSO 不是必须9:1, 这种方式太奢侈了,FBS很贵,且一般务必要,除非是贵重的淋巴细胞等。 一般用完全培养基(含10-20%FBS)与DMSO按一定比例冻存,例如9:1  或95:5冻存,有一定偏差也是可以的。

另外,还有一些是无血清培养的细胞,也不能添加血清,这时就用无血清培养基(根据细胞特性定制的培养基)加入5-10%的DMSO来冻存。

总之,不是必须FBS:DMSO=9:1, 那是很古老的文献资料里常提到的冻存方案。

细胞类型和细胞株个体特性。不同细胞有其最佳冻存条件,不尽相同,需参考说明书和文献。如果发现细胞冻存后状态不佳,需要自己摸条件,或考虑污染和培养条件问题。

 细胞冻存液


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