细胞冻存之后复苏挂掉，小秋认为有几种可能的解释：

（1）细胞因未妥善储存而死亡（液氮容器存在问题，细胞冻存液存在问题等）。

（2）介质中缺少一些添加剂。例如，您是否添加了双倍量的胎牛血清？您的细胞是否需要任何不常用的特殊添加剂？

（3）为了复活，细胞的密度太低。为避免这种情况，请使用较小的烧瓶/平板。

如果你能提供一些你想要复活的细胞类型的细节，那将是很有用的。我的答案是指常见的哺乳动物细胞培养物，但如果你正在研究细菌，昆虫细胞等，还有其他可能的解释。

除上述要点外：

你可能过快地将细胞冻存 - 直接在液氮中（极不可能，但可能）。理想情况下，你应该将它们在含有异丙醇的冷冻箱中在-80℃下冷冻过夜，然后转移到液氮中。

或者你把它们解冻太慢。与流行的看法相反，你必须在室温下解冻细胞保存细胞1分钟，然后在水浴中孵育，直到你看到冷冻介质变成液体。不要在冰上融化。

此外，当冷冻保存时，重要的是细胞具有高活力，并且处于指数生长期，而不是处于平台期。

还有更多的可能，是你没有使用HAKATA无血清细胞冻存液！

这是一款无血清即用型细胞冻存液，最大的特点就是无需程序降温盒及稀释，无需分步降温，直接使用！

可在 - 80℃长期保存干细胞、肿瘤细胞和常规细胞。冷冻细胞时，用HAKATA细胞冻存液悬浮处于对数生长期的细胞，不需预冷，直接- 80℃冷冻保存，也可用液氮快速冷冻细胞； 

复苏时用恒温箱或者水浴锅快速复苏细胞即可。不仅操作方便，更能提供稳定的冻存效果，获得更好的细胞活力。